ClinoStar®细胞培养系统是一种用于大规模细胞培养和生物制剂生产的技术平台,主要用于细胞培养、细胞扩增和生物药物生产等领域。该系统的设计目标是提供一个高效、可控、灵活的培养环境,适应不同类型的细胞系,如哺乳动物细胞、昆虫细胞等。
以下是ClinoStar®系统的基本细胞培养方法:
1.选择适当的细胞系
在使用ClinoStar®系统之前,首先需要选择适合系统的细胞系。通常,系统支持哺乳动物细胞(如CHO细胞、HEK293细胞等)和一些昆虫细胞系。
根据细胞系的要求选择适当的培养基、补充物及其它添加剂。
2.准备培养基和添加剂
培养基:根据选择的细胞系,准备相应的培养基。一般来说,ClinoStar®系统需要配合专用的细胞培养基进行使用,确保细胞能够获得充足的营养和生长因子。
添加剂:包括生长因子、抗生素、抗真菌剂等,这些添加剂的选择应根据细胞类型和实验需求来调整。
3.系统初始化与安装
培养室环境:确保ClinoStar®系统的培养室环境稳定,温度、湿度和CO₂浓度等参数符合细胞生长的需求。
培养器具安装:检查并安装培养容器,如培养瓶、培养盘等,确保无污染。
培养系统消毒:在培养前,确保系统的各个部件已经消毒完毕。
4.接种细胞
细胞准备:取出冻存细胞并进行复苏,或从液氮中取出细胞种子,进行解冻。
接种密度:根据细胞种类和实验要求,调整接种密度。通常,ClinoStar®系统会提供细胞接种的密度推荐值。
接种过程:将复苏后的细胞接种到培养器皿中,保持无菌操作,确保细胞均匀分布。
5.培养条件控制
温度控制:ClinoStar®系统通常支持37°C的培养温度,模拟体内细胞生长的条件,某些系统也允许其他温度设定。
pH值和CO₂控制:培养系统内有自动化的pH和CO₂监控与调节功能,确保细胞培养液的pH稳定在适宜范围内(一般在7.0-7.4之间)。
氧气浓度控制:某些系统还允许氧气浓度的调节,以满足细胞的不同需求。
6.细胞培养过程
细胞生长监控:定期检查细胞的生长状态,包括细胞密度、形态、健康状况等。
分次培养:根据细胞的生长速率,适时进行培养基更换、补充营养。某些系统允许进行自动化的培养基更换,以提高培养效率。
培养瓶翻转:ClinoStar®系统通常会提供自动翻转功能,以促进气体交换和细胞的均匀分布。
7.细胞扩增与收获
细胞扩增:根据需要,进行细胞扩增。通过增加培养基的补充或调整培养器皿的体积,促进细胞的生长和扩增。
细胞收获:当细胞达到一定密度或处于对数生长期时,进行细胞收获。可以通过离心、过滤等方法分离细胞和培养基,收集细胞进行进一步实验或产品生产。
8.废液处理和系统清洁
废液处理:所有废液和废弃物(如过期培养基、细胞残渣等)需按规定的生物危害废弃物处理程序进行处置。
系统清洁:在培养结束后,确保ClinoStar®系统各部分进行清洁和消毒,防止交叉污染。
9.数据记录和质量控制
数据记录:ClinoStar®系统通常配备数据记录和监控功能,能够自动记录培养参数、细胞生长状态、培养基变化等信息,以便追踪实验进程。
质量控制:确保培养过程符合GMP(GoodManufacturingPractice)或其它相关质量标准,尤其是在药物生产或细胞治疗应用时,质量控制尤为重要。
10.系统维护
定期维护:定期检查系统设备的工作状态,如温度、湿度、pH值的自动调节功能等,确保设备的正常运行。
软件升级:系统的管理软件和监控软件应保持更新,以确保操作便捷性和准确性。
小贴士:
根据细胞类型调整培养条件和操作流程,确保优生长状态。
定期检查和校准系统设备,特别是培养环境控制参数。
注意无菌操作,避免污染。
ClinoStar®系统在细胞培养的自动化、灵活性、效率等方面提供了很多优势,特别是在细胞扩增和生物制剂生产中,可以显著提升产量和生产效率。