资料下载

news

当前位置:首页  /  资料下载  /  使用细胞和重组ACE2受体对COVID-1病毒S1蛋白进行动力学测量

使用细胞和重组ACE2受体对COVID-1病毒S1蛋白进行动力学测量

更新时间:2023/7/31

浏览次数:337

      Covid 感染是由空气传播的冠状病毒 (SARS-CoV-2) 及其突变体引起的。病毒对宿主细胞的侵袭主要是通过病毒附着在宿主上皮细胞中的血管紧张素(Ang)转换酶(ACE2)上,在病毒感染期间,三聚体S蛋白被裂解成S1和S2亚基,其中S1亚基包含受体结合域(RBD),其直接与ACE的肽酶结构域结合。因此,更好地了解S1和ACE2之间的结合相互作用是开发抗病物的关键。

     SPR与膜蛋白的动力学相互作用研究通常需要从宿主细胞环境中分离和纯化它们。通过将具有His标签和Avi标签的分离ACE2固定于芯片表面用于与SARS-CoV-2 S1蛋白的动力学结合相互作用研究,结果与已发表的文献吻合良好。然而,提取或重组受体的构象可能与膜环境中相同受体的构象不同。这些改变会影响受体的自然功能和结合行为。因此,膜蛋白在其自然环境中的结合亲和力和动力学参数的测量可能更准确。 使用 SPRm仪器测量 S1 蛋白与 HEK 293 细胞上 ACE2受体的相互作用。为此,接种HEK 293细胞并使其粘附在传感器芯片表面。细胞固定后,将六种S1蛋白溶液(12.00、19.25、38.50、77.00、154.00和192.50 nM)连续注射暴露于细胞中。根据统计分析,S1与重组ACE2受体的动力学相互作用表现出1.10nM的亲和力,而基于天然细胞的环境表现出较弱的5.0 nM亲和力。




文件下载    

分享到